PGM1人多潛能干細胞復蘇完全培養基
貨號: CA1011008/ CA1011100
規格: 10mL/10*10mL儲存條件:
化凍后1個月內可以儲存于 2 ~ 8℃,長期存放于-80℃ ~ -20℃
產品簡介:
PGM1人多潛能干細胞復蘇完全培養基是賽貝生物(Cellapy)針對復蘇存活率較低的人多潛能干細胞研發的產品,其含有促進細胞貼壁存活的因子,可大幅提高hESC/hiPSC復蘇的效率。
產品內容:
| 組份代碼 | 名稱 | 規格 | 數量 |
| CA1011008/ CA1011100 | PGM1 人多潛能干細胞復蘇完全培養基 | 10mL/10*10mL | 1 瓶/1 包 |
(如需細胞的傳代復蘇及凍存操作,請詳見《hES/hiPS細胞傳代復蘇及凍存說明書》)細胞復蘇操作流程:
1. 將PGM1人多潛能干細胞復蘇完全培養基取出并平衡至室溫; 取出包被過PSCeasy®人多潛能干細胞鋪底工作液的培養皿/瓶,吸去包被液并加入適量PGM1人多潛能干細胞復蘇完全培養基,置于5% CO2的37℃恒溫細胞培養箱中。
2. 37℃水浴解凍細胞,小心搖晃使細胞融化至僅剩一小塊冰晶,迅速取出并用75%酒精消毒凍存管外表面,轉移至無菌操作臺中。
3. 將細胞懸液轉移至新的15mL離心管中,緩慢加入4mL PGM1人多潛能干細胞完全培養基,輕柔吹吸2次混勻。
4. 200g離心5分鐘。
5. 棄上清,加入適量PGM1人多潛能干細胞復蘇完全培養基重懸細胞,輕柔吹吸2次混勻,并接種到準備好的培養皿中,顯微鏡下觀察細胞呈4 ~ 10個細胞大小的團塊。
6. 水平十字搖勻, 于室溫放置10 ~ 15分鐘。 顯微鏡下觀察到大部分克隆貼在皿底后5% CO2的37℃恒溫細胞培養箱中培養24小時。
7. 棄掉PGM1人多潛能干細胞復蘇完全培養基,加入新鮮的PSCeasy® /PGM1 完全培養基繼續培養,每天更換新鮮的PSCeasy®/PGM1完全培養基。
疑難解答:
? PGM1人多潛能干細胞復蘇培養基的優勢
PGM1人多潛能干細胞復蘇培養基中含有促進細胞貼壁、存活的因子,可大幅提高復蘇的效率。尤其對于難以保種的低代次人ESC/iPSC,用PGM1人多潛能干細胞復蘇完全培養基可達到理想的保種效果。
? 是否能在37℃反復水浴PGM1人多潛能干細胞復蘇培養基完全培養基
不能。頻繁地在4℃和37℃之間轉換會導致PGM1人多潛能干細胞復蘇完全培養基中含有的因子失活, PGM1人多潛能干細胞復蘇完全培養基在使用前平衡至室溫即可。
? 細胞復蘇率低是什么原因
細胞復蘇需使用PGM1人多潛能干細胞復蘇完全培養基,可大幅提高細胞的復蘇效率。復蘇過程中,轉移細胞、吹打混勻和重懸細胞時,吹打力度要輕柔,并盡量減少吹打次數,細胞接種后,即刻在顯微鏡下觀察細胞團塊的大小, 4 ~ 10個細胞的團塊為最佳。如果吹打力度過大或次數過多,導致細胞分散成單細胞,細胞復蘇率將偏低。
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